Monkeypox Virus Real Time PCR ნაკრები

Მოკლე აღწერა:

Კატა.არა	B001P-01	ზომა	48 ტესტები / ნაკრები
ნიმუში	შრატი/დაზიანების ექსუდატი	ტრანს.& სტო.Ტემპი.	-25-15℃
ფორმატი	პრემიქსი ლიოფილიზებული იყო და ალიკოტირებული იყო 8 ზოლიანი PCR ტუბში
მოქმედი ინსტრუმენტი	რეალურ დროში PCR ინსტრუმენტი, როგორიცაა ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio და BTK-8

გამოგვიგზავნეთ ელ.წერილი

პროდუქტის დეტალი

პროდუქტის ტეგები

Პროდუქტის აღწერილობა

Დანიშნულებისამებრ გამოყენების

იგი გამოიყენება მაიმუნის ვირუსის გამოსავლენად ადამიანის შრატში ან დაზიანების ექსუდატის ნიმუშებში რეალურ დროში PCR სისტემების გამოყენებით.

ტესტის პრინციპი

ეს პროდუქტი არის ფლუორესცენტური ზონდზე დაფუძნებული Taqman® რეალურ დროში PCR ანალიზის სისტემა.სპეციფიკური პრაიმერები და ზონდები შექმნილია Monkeypox Virus-ის F3L გენის გამოსავლენად.შინაგანი კონტროლი, რომელიც მიზნად ისახავს ადამიანის კონსერვაციულ გენს, აკონტროლებს ნიმუშის შეგროვებას, ნიმუშების დამუშავებას და რეალურ დროში PCR პროცესს, რათა თავიდან იქნას აცილებული ცრუ უარყოფითი შედეგები.ნაკრები არის სრულად პრემიქსი ლიოფილიზებული სისტემა, რომელიც მოიცავს მაიმუნის ვირუსის გამოვლენისთვის საჭირო მასალებს: ნუკლეინის მჟავას ამპლიფიკაციის ფერმენტს, UDG ფერმენტს, რეაქციის ბუფერს, სპეციფიკურ პრაიმერს და ზონდს.

ძირითადი შინაარსი

მოწოდებული კომპონენტები ჩამოთვლილია ცხრილში.

კომპონენტები	პაკეტი	ინგრედიენტი
Monkeypox ვირუსილიოფილიზებული პრემიქსი	8 ზოლიანი PCR მილები× 6 ჩანთა	პრაიმერები, ზონდები, dNTP/dUTP Mix, Mg2+, Taq დნმ პოლიმერაზა, UDG ფერმენტი
MPV პოზიტიური კონტროლი	400 μL×1 ტუბი	Target გენის შემცველი დნმ-ის თანმიმდევრობები
MPV უარყოფითი კონტროლი	400 μL×1 ტუბი	დნმ-ის თანმიმდევრობები, რომლებიც შეიცავს ადამიანის გენის სეგმენტს
გამხსნელი ხსნარი	1 მლ × 1 ტუბი	სტაბილიზატორი
Შესაბამისობის სერთიფიკატი	1 ნაჭერი	/

ოპერაციის ნაკადი

1. ნიმუშიკოლექცია:ნიმუში უნდა შეგროვდეს სტერილურ მილებში შესაბამისად

სტანდარტული ტექნიკური მახასიათებლებით.

2. რეაგენტის მომზადება (რეაგენტის მომზადების ზონა)

ამოიღეთ ნაკრების კომპონენტები, დააბალანსეთ ისინი ოთახის ტემპერატურაზე მოლოდინის რეჟიმში გამოყენებისთვის.

3. ნიმუშის დამუშავება (ნიმუშების დამუშავების არეალი)

3.1 ნუკლეინის მჟავის ექსტრაქცია

რეკომენდებულია 200μL თხევადი ნიმუშების, დადებითი კონტროლისა და უარყოფითი კონტროლის აღება ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციისთვის, ვირუსული დნმ-ის ექსტრაქციის ნაკრების შესაბამისი მოთხოვნებისა და პროცედურების შესაბამისად.

3.2 ლიოფილიზებული ფხვნილის დაშლა და შაბლონის დამატება

მოამზადეთ Monkeypox Virus ლიოფილიზებული პრემიქსი ნიმუშების რაოდენობის მიხედვით.ერთ ნიმუშს სჭირდება ერთი PCR ტუბი, რომელიც შეიცავს ლიოფილიზებულ პრემიქსის ფხვნილს.უარყოფითი კონტროლი და დადებითი კონტროლი უნდა განიხილებოდეს როგორც ორი ნიმუში.

(1) დაამატეთ 15 μL გამხსნელი ხსნარი თითოეულ PCR ტუბში, რომელიც შეიცავს ლიოფილიზებულ პრემიქსს, შემდეგ დაამატეთ 5 μL ამოღებული ნიმუშები/უარყოფითი კონტროლი/დადებითი კონტროლი თითოეულ PCR ტუბში შესაბამისად.

(2) მჭიდროდ დააფარეთ PCR მილები, აურიეთ PCR მილები ხელით, სანამ ლიოფილიზებული ფხვნილი მთლიანად არ დაიშლება და არ აირევა, შეაგროვეთ სითხე PCR მილების ძირში მყისიერი დაბალი სიჩქარით ცენტრიფუგაციით.

(3) თუ გამოიყენებთ საერთო რეალურ დროში PCR ინსტრუმენტს გამოვლენისთვის, მაშინ პირდაპირ გადაიტანეთ PCR მილები გამაძლიერებელ ზონაში;თუ გამოიყენებთ BTK-8 გამოვლენისთვის, მაშინ უნდა შეასრულოთ შემდეგი ოპერაციები: გადაიტანეთ 10 μL სითხე PCR მილიდან BTK-8-ის რეაქციის ჩიპის ჭაში.ერთი PCR მილი შეესაბამება ერთ ჭაბურღილს ჩიპზე.პიპეტინგის მუშაობისას დარწმუნდით, რომ პიპეტი არის 90 გრადუსი ვერტიკალურად.აეროზოლური ბარიერის პიპეტის წვერები უნდა განთავსდეს ჭაბურღილის ცენტრში ზომიერი ძალით და შეწყვიტოს პიპეტის ბიძგი, როდესაც ის მიაღწევს პირველ გადაცემას (ბუშტების თავიდან ასაცილებლად).ჭაბურღილების შევსების შემდეგ, ამოიღეთ რეაქციის ჩიპის მემბრანა, რომ დაფაროს ყველა ჭაბურღილი და ჩიპი გადაეცემა ამპლიფიკაციის აღმოჩენის ზონაში.

4. PCR გაძლიერება (გამოვლენის არე)

4.1 ჩადეთ PCR მილები/რეაქციის ჩიპი რეაქციის ავზში და დააყენეთ თითოეული რეაქციის სახელები შესაბამისი თანმიმდევრობით.

4.2 გამოვლენის ფლუორესცენციის პარამეტრები: (1) Monkeypox virus (FAM);(2) შიდა კონტროლი (CY5).

4.3 გაუშვით შემდეგი ველოსიპედის პროტოკოლი

ABI7500, Bio-Rad CFX96, SLAN-96S, QuantStudio-ს პროტოკოლი:

ნაბიჯები		ტემპერატურა	დრო	ციკლები
1	წინასწარი დენატურაცია	95℃	2 წთ	1
2	დენატურაცია	95℃	10 წმ	45
2	ანეილირება, გაფართოება, ფლუორესცენციის მიღება	60℃	30 წ	45

BTK-8-ის პროტოკოლი:

ნაბიჯები		ტემპერატურა	დრო	ციკლები
1	წინასწარი დენატურაცია	95℃	2 წთ	1
2	დენატურაცია	95℃	5 წმ	45
2	ანეილირება, გაფართოება, ფლუორესცენციის მიღება	60℃	14 წ	45

5. შედეგების ანალიზი (გთხოვთ იხილეთ ინსტრუმენტის მომხმარებლის სახელმძღვანელო)

რეაქციის შემდეგ, შედეგები ავტომატურად შეინახება.დააწკაპუნეთ „ანალიზზე“ ანალიზისთვის და ინსტრუმენტი ავტომატურად განმარტავს თითოეული ნიმუშის Ct მნიშვნელობებს შედეგის სვეტში.უარყოფითი და დადებითი კონტროლის შედეგები უნდა შეესაბამებოდეს შემდეგს „6. ხარისხის კონტროლი“.

6. Ხარისხის კონტროლი

6.1 უარყოფითი კონტროლი: არ არის Ct ან Ct>40 FAM არხში, Ct≤40 CY5 არხში ნორმალური გამაძლიერებელი მრუდით.

6.2 დადებითი კონტროლი: Ct≤35 FAM არხში ნორმალური გამაძლიერებელი მრუდით, Ct≤40 CY5 არხში ნორმალური გამაძლიერებელი მრუდით.

6.3 შედეგი ძალაშია, თუ ყველა ზემოთ ჩამოთვლილი კრიტერიუმი დაკმაყოფილებულია.წინააღმდეგ შემთხვევაში, შედეგი არასწორია.

შედეგის ინტერპრეტაცია

შესაძლებელია შემდეგი შედეგები:

	FAM არხის Ct მნიშვნელობა	CY5 არხის Ct მნიშვნელობა	ინტერპრეტაცია
1#	არა Ct ან Ct>40	≤40	Monkeypox ვირუსი უარყოფითი
2#	≤40	ნებისმიერი შედეგი	Monkeypox ვირუსი დადებითია
3#	40-45	≤40	ხელახალი ტესტირება;თუ ის ჯერ კიდევ 40-45, შეატყობინეთ როგორც 1#
4#	არა Ct ან Ct>40	არა Ct ან Ct>40	არასწორი

ᲨᲔᲜᲘᲨᲕᲜᲐ: თუ შედეგი არასწორია, ნიმუში უნდა შეგროვდეს და ხელახლა შემოწმდეს.

შეკვეთის ინფორმაცია

Პროდუქტის სახელი	Კატა.არა	ზომა	ნიმუში	შენახვის ვადა	ტრანს.& სტო.Ტემპი.
Monkeypox Virus Real Time PCR ნაკრები	B001P-01	48 ტესტი / ნაკრები	შრატი/დაზიანების ექსუდატი	12 თვე	-25-15℃